|
服務平臺聚酰胺樹脂使用說明書
來源:本站 日期:2011-12-09 09:20:48
層析用聚酰胺樹脂使用說明書1.產品介紹 1.1技術指標: 分 子 量:14000~17000 比表面積:5~10m2/g PH 值:6~7 溶 解 度:溶于濃鹽酸,甲酸,微溶于醋酸,苯酚等溶劑,不溶于水,甲醇,乙醇,丙酮,乙醚,氯仿和苯等常用有機溶劑,對堿較穩定,對酸的穩定性較差,尤其是無機酸,在溫度高時更敏感。 1.2主要用途: 聚酰胺特別適用于多元酚類化合物的分離,如黃酮、醌類、酚酸、含羰基化合物、羧基化合物等。由于其對鞣質吸附強,也可用于將植物粗提物中的鞣質除去。 2.使用說明書 2.1樹脂性能簡介: 聚酰胺是由酰胺鍵聚合形成的高分子化合物。其酰胺基可與羥基酚類,酸類,醌類,硝基等化合物以氫鍵形成結合而被吸附 ,其脂肪長鏈可作為分配層析的載體。聚酰胺在含水系統中層析時,聚酰胺作為非極性固定相,其層析行為反向柱層析;在非水溶劑系統時,聚酰胺作為分配層析的載體,其層析行為為正向柱層析。 2.2預處理: 取聚酰胺以90-95%乙醇浸泡,不斷攪拌,除去氣泡后裝入柱中。用3-4倍體積的90-95%乙醇洗脫,洗至洗脫液透明并在蒸干后無殘渣(或極少殘渣)。再依次用2-2.5倍體積5%NaOH水溶液、1倍體積的蒸餾水、2-2.5倍體積的10%醋酸水溶液洗脫,最后用蒸餾水洗脫至pH中性,備用。 2.3:使用方法: 1、裝柱:一般將顆粒狀聚酰胺混懸于水中,使其充分膨脹,然后裝柱,讓聚酰胺自由沉降;當用非極性溶劑系統時候,則用組分中低級性的溶劑裝柱。 2、稀釋適當濃度上樣:一般每100ml聚酰胺上樣1.5-2.5g,樣品先用洗脫溶劑溶解,濃度為20%-30%。水溶性化合物直接上樣;若提取物水溶性不好,則用揮發性有機溶媒溶解、拌適量聚酰胺、揮干或減壓蒸干、干法裝入柱頂。 3、水洗:先用水洗脫。 4、醇洗:在水中遞增乙醇濃度至濃乙醇溶液,或氯仿、氯仿-甲醇,遞增甲醇至純甲醇洗脫。若仍有物質未被洗脫,可用稀氨水或稀甲酰胺溶液洗脫,分段收集。 5、找到最佳吸附比:先小量試驗找到最佳吸附比。 6、放大:根據小試及最佳吸附比進行放大試驗。 7、聚酰胺的回收:使用過的聚酰胺一般用5%氫氧化鈉溶液洗滌,然后水洗,再用10%醋酸液洗,然后用蒸餾水洗至中性,即可。 2.4再生: 一般用5%NaOH水溶液洗脫,洗至NaOH水溶液顏色極淡為止。有時因某些鞣質與聚酰胺有不可逆吸附,用NaOH水溶液很難洗脫,可用5%NaOH在柱中浸泡,每天將柱中的NaOH水溶液放出一次,并加入新的5%NaOH水溶液,這樣浸泡一周后,鞣質可基本洗脫完。然后用蒸餾水洗脫至pH8-9,再用2倍量的10%醋酸水溶液洗脫,最后蒸餾水洗脫至pH中性,重復使用。 2.5低分子雜質的去除方法: 1.裝柱前先過篩 2.裝柱時用5%甲醇或10%鹽酸預先除去小分子雜質 3.應用舉例 3.1黃酮類化合物的分離: 由于黃酮類化合物具有兩個以上芳香核,且大多數化合物具有游離酚烴基,因此能夠吸附在聚酰胺柱上。由于苷元的吸附能力比苷強,一般苷在水或稀醇液洗脫時即可洗下,而苷元則需較濃的醇液才能洗脫下來。 3.2酸類及酚類化合物的分離: 聚酰胺對脂肪族一元酸的吸附力較小,而對芳香族酸類及脂肪族多元酸的吸附能力較大,分離效果較好。酚類物質用聚酰胺層析分離效果更好。 3.3鞣質的分離和去除 鞣質是一類多酚性物質,很容易吸附在聚酰胺樹脂柱上。低分子鞣質的吸附是可逆的,可采用適當的溶劑洗脫而得到分離。高分子鞣質的吸附是不可逆的,吸附后很難洗脫。而無論低分子或高分子鞣質,它們與聚酰胺的吸附比其它的化合物都要強,因此可用聚酰胺去除鞣質。 聚酰胺柱層析法在天然產物的提取分離中發揮了較大的作用。但在實際應用中,常常存在流速較慢和混入低分子雜質(酰胺的低聚物等)的問題。通常情況下,流速問題可以通過預先過篩除去細粉或與硅藻土混合制粒予以克服;而低分子物質的干擾,可在裝柱時用5%甲醇或10%鹽酸預洗除去。 |
||||||||||||||||||||||